動(dòng)物血清鑒別方法與動(dòng)物血清保存方法
?培養(yǎng)基需要在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用。有些培養(yǎng)基需要合成培養(yǎng)基和動(dòng)物血清。有些細(xì)胞只有加入血清才能正常分裂。因此,動(dòng)物血清也是研究人員經(jīng)常使用的產(chǎn)品。然而,我們?nèi)匀粚?duì)動(dòng)物血清的識(shí)別方法、保存方法和用途知之甚少。應(yīng)該如何識(shí)別?
動(dòng)物血清鑒別方法:
血液凝固沉淀的淡黃色透明液體。如果將血液從血管中取出,放入試管中,沒(méi)有抗凝劑,凝血反應(yīng)會(huì)被激活,血液會(huì)迅速凝固,形成果凍。周?chē)恋淼牡S色透明液體是血清,凝血后也可以通過(guò)離心獲得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白塊,所以血清中沒(méi)有纖維蛋白原,這與血漿不同。
在凝血反應(yīng)中,許多物質(zhì)被釋放出來(lái),每個(gè)凝血因子都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)改變。例如,凝血酶原變成凝血酶,隨著血清的儲(chǔ)存時(shí)間逐漸減少甚至消失。這些也和血漿不一樣。然而,大量未參與凝血反應(yīng)的物質(zhì)與血漿基本相同。為了避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析都是以血清為樣品的。
保存動(dòng)物血清的方法:
長(zhǎng)時(shí)間保存的血清應(yīng)該儲(chǔ)存在-20?!?70℃在低溫冰箱里℃不要在冰箱里保存超過(guò)一個(gè)月。因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加10%左右,所以在冷凍到低溫冰箱之前,血清會(huì)預(yù)留一定的體積空間,否則很容易被污染或者玻璃瓶?jī)隽选?/span>
2.一般廠家提供的血清是無(wú)菌的,不需要過(guò)濾殺菌。如果發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,可以在培養(yǎng)液中加入血清一起過(guò)濾,不要直接過(guò)濾血清。
血清解凍:瓶裝血清解凍需要采用逐步解凍法:-20℃至-70℃將血清放入低溫冰箱4℃在冰箱里溶解一天。然后移入室溫,全部溶解后重新包裝。在溶解過(guò)程中,需要輕輕搖晃均勻(注意不要造成氣泡),使溫度和成分均勻,減少沉淀。不要直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣由于溫度變化過(guò)大,很容易導(dǎo)致蛋白質(zhì)凝聚而沉淀。
熱滅活指的是56℃,30分鐘加熱已經(jīng)完全解凍的血清。在加熱過(guò)程中,規(guī)則務(wù)必均勻搖晃。這種熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)充成分(complement)滅活。由于熱處理會(huì)導(dǎo)致血清沉淀物顯著增多,所以一般不建議進(jìn)行這種熱處理。